化工学报 ›› 2011, Vol. 62 ›› Issue (10): 2876-2884.

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聚乙二醇修饰重组人干扰素ω的过程优化

潘红春,刘红,程永刚,彭力,徐波,杨红涛   

  • 出版日期:2011-10-05 发布日期:2011-10-05

  • Online:2011-10-05 Published:2011-10-05

摘要:

采用分子量20000直链单甲氧基PEG琥珀酰亚胺琥珀酸酯(mPEGSS)对毕赤酵母表达的重组人干扰素ω(rhIFNω)进行氨基化学修饰,以期获得抗原性降低及稳定性增加的单链PEG修饰产物(PEG-rhIFNω)。建立了PEG修饰rhIFNω的反应体系,考察了修饰反应各因素对单修饰产物得率的影响,优化修饰工艺条件为:反应体系起始pH值8.5,rhIFNω/PEG摩尔比1∶7,rhIFNω浓度0.75 mg·ml-1,磷酸盐缓冲液浓度50mmol·L-1,于25℃振荡反应4 h,用30%冰醋酸终止反应。在优化条件下,单链PEGrhIFNω含量和修饰率分别达到0.25 mg·ml-1和34.63%。纯化后的单链PEG-rhIFNω具有典型PEG修饰蛋白的特性,体外抗病毒活性保留了天然rhIFNω抗病毒活性的15%。